人們之前認為只有真菌DNA發(fā)生的突變才會導致對抗真菌藥物產生抗藥性。目前的診斷技術依賴于對真菌DNA進行測序來尋找這樣的突變。

在一項新的研究中，來自英國愛丁堡大學的研究人員發(fā)現(xiàn)真菌可以在不改變它們的DNA---它們的遺傳密碼---的情形下產生抗藥性。相關研究結果發(fā)表在2020年9月17日的Nature期刊上，論文標題為“Epigenetic gene silencing by heterochromatin primes fungal resistance”。

 

這項新的研究發(fā)現(xiàn)，真菌可以在沒有基因變化的情況下出現(xiàn)抗藥性。相反，真菌表現(xiàn)出表觀遺傳變化---不影響它們的DNA的變化，這表明真菌抗藥性的許多原因可能在以前被忽略了。

每年真菌疾病影響十億人，據估計造成160萬人死亡?？顾幮哉婢腥臼且粋€日益嚴重的問題，特別是在免疫系統(tǒng)較弱的患者中，如HIV感染者。目前有效的抗真菌藥物很少。

過度使用農業(yè)殺真菌劑也導致土壤傳播的真菌的抗藥性增加。真菌疾病每年導致世界上多達三分之一的糧食作物損失。

在這項新的研究中，這些研究人員通過使用模擬抗真菌藥物活性的caffeine處理一種稱為裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）的酵母菌，觀察到這種酵母菌出現(xiàn)抗藥性。他們發(fā)現(xiàn)由此產生的抗藥性酵母菌在影響它們的DNA組裝方式的特殊化學標簽上發(fā)生了改變。一些基因被包裝在稱為異染色質的結構中，它使得基因沉默或失活，換言之，這種表觀遺傳變化導致這種酵母菌產生抗藥性。

這一發(fā)現(xiàn)可能為通過改進現(xiàn)有的表觀遺傳藥物或開發(fā)干擾真菌異染色質的新藥物來治療耐藥性真菌感染鋪平道路。

改進的殺菌劑處理糧食作物可以限制農業(yè)損失，也可以減少環(huán)境中持續(xù)加劇人類感染的抗藥性真菌菌株的數量。

論文通訊作者、愛丁堡大學生物科學學院細胞生物學研究所惠康細胞生物學中心的Robin Allshire教授說，“這些發(fā)現(xiàn)可能對理解植物、動物和人類真菌病原體如何對非常有限的有效抗真菌藥物治療產生抗藥性產生影響，我們的團隊對此感到興奮。”

支原體是細胞外生存的小微生物，是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在0.2~0.5um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲形、分枝狀等多種態(tài)。

1、支原體存在于我們周圍，他可能就如塵埃一樣存在于我們的環(huán)境中

2、可透過一般的濾膜，所以不要寄希望于過濾可以清楚支原體污染的液體

支原體對培養(yǎng)細胞的污染發(fā)生率高，據估計平均發(fā)生率在60%左右。同時又非常隱秘，早期不容易被發(fā)現(xiàn)，除非用特異性和靈敏度都非常高的檢測試劑盒。支原體因為個頭小，能穿過0.22微米濾器，并且在實驗室內會潛在的擴散。支原體污染使得用被污染的細胞樣本做的實驗*失去意義和價值。

那我們在做細胞培養(yǎng)時如何檢測支原體呢？

 

1. 支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒（一步法）

用途說明：

1）適合科研單位檢測，或單位內檢，用PCR法檢測細胞或其他生物基質。

2) 比藥典操作標準合并了一步，（將內控對照試劑預先混合在PCR mix試劑中），操作更簡潔。

3)樣本量為2μl，靈敏度為20個基因組拷貝/反應。結果準確。

2. 支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒（經典法，不含Taq酶）

用途說明：

1) 符合歐洲藥典、中國藥典要求，更適合細胞治療，CAR-T，抗體藥、疫苗等臨床項目申報和質檢。

2）樣本需先做DNA抽提。抽提后樣本加入量為10μl。

3）試劑盒中不含Taq酶，需另外購買。

4) 廠家可協(xié)助完善方法驗證步驟。

3. 支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒（經典法，含Taq酶）

用途說明：

1) 符合歐洲藥典、中國藥典要求，更適合細胞治療，CAR-T，抗體藥、疫苗等臨床項目申報和質檢。

2）樣本需先做DNA抽提。抽提后樣本加入量為10μl。

3）試劑盒中含Taq酶，無需另外購買。

4) 廠家可協(xié)助完善方法驗證步驟。

4. 支原體常規(guī)PCR檢測試劑盒（預分裝法）

用途說明：

1）適合科研單位檢測，或單位內檢，用PCR法檢測細胞或其他生物基質。

2) 比一步法更為方便。表現(xiàn)在：

① PCR組分（包括酶、核苷酸、引物、內控對照，均為凍干粉）和上樣緩沖液/染料已預先分裝在八連管中。

② PCR結束后，產物直接上膠，不需再加上樣緩沖液和染料。

3)價格比一步法略高。適合想節(jié)省時間、追求簡易的用戶。