葉酸是乳酸桿菌生長的必需營養(yǎng)素，微生物法檢測葉酸是利用乳酸桿菌生長速度與葉酸含量相關(guān)的原理建立的。與其他葉酸檢測的方法相比，微生物法具有許多優(yōu)點(diǎn)：樣品預(yù)處理簡單、對(duì)設(shè)備要求不高、成本低廉等。

許多機(jī)構(gòu)都將微生物法作為葉酸分析的標(biāo)準(zhǔn)方法，我國國家標(biāo)準(zhǔn)《嬰幼兒配方食品和乳粉通用檢驗(yàn)方法》中測定葉酸的方法即為微生物法。1988 年 Horrne 等應(yīng)用 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板以干酪乳酸桿菌(Lactobacillias Casei)對(duì)葉酸進(jìn)行微量檢測，將甘油冷凍保存乳酸桿菌與96孔酶標(biāo)板相結(jié)合，使得測定時(shí)間大為縮短。菌株對(duì)多數(shù)葉酸形式反應(yīng)相似，能測定單和多谷氨酸葉酸，靈敏度很高，能達(dá)到ng 水平，具有較高的靈敏度和重現(xiàn)性。

這一方法對(duì)菌種的處理、分裝和保存，以及操作過程都作了重大改進(jìn)，已被認(rèn)為是目前可靠、簡便、迅速和微量檢測葉酸的方法。

96 孔板微生物法測葉酸能夠獲得準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好的結(jié)果。稀釋倍數(shù)對(duì)測定結(jié)果影響不大，結(jié)果穩(wěn)定?？紤]其成本低廉，樣本預(yù)處理簡單以及對(duì)設(shè)備要求不高等優(yōu)點(diǎn)，適合于大批量測定，可用于大樣本的血液流行病學(xué)研究。此方法還可用于其他生物組織和食品中葉酸含量的測定，這對(duì)國內(nèi)開展葉酸檢測有著較大的意義。

應(yīng)用96孔板法測定葉酸含量時(shí)，選擇測定用葉酸培養(yǎng)基，這里推薦的是上HiMedia公司生產(chǎn)的葉酸測定用培養(yǎng)基（貨號(hào)：M543），該培養(yǎng)基由Himedia Laboratories生產(chǎn)，嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)，國產(chǎn)葉酸培養(yǎng)基含有痕量葉酸，易導(dǎo)致測定結(jié)果偏高，實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)確性比較差，HiMedia葉酸測定用培養(yǎng)基有認(rèn)證的GMP，CE和FDA，ISO9001，ISO13485等證書，成分符合《GB5009.211-2014 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中葉酸的測定》，測定結(jié)果準(zhǔn)確性高。