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支原體PCR檢測實驗操作樣品的收集

更新時間:2017-11-17  |  點(diǎn)擊率:1641
  支原體PCR檢測實驗操作樣品的收集
  
  支原體PCR檢測實驗操作
  
  PCR反應(yīng)的前期操作應(yīng)在無菌環(huán)境中進(jìn)行。
  
  (1)樣品的收集:待測細(xì)胞用抗培養(yǎng)基培養(yǎng)7d,用無菌容器取上清液500ul,4℃保存待測。
  
 ?。?)模板的制作:在無菌的條件下,取細(xì)胞培養(yǎng)上清100ul于一無菌的0.5ml塑料離心管內(nèi),蓋好蓋子,95℃水浴加熱5min。
  
 ?。?)打開蓋子,向管內(nèi)加StrataCleanresin10ul,蓋好蓋子,旋渦混懸器混合,離心5—10s,吸取上清至一新的塑料離心管中,模板制作完畢,4℃保存。
  
 ?。?)PCR反應(yīng):反應(yīng)體系zui適條件為:10mmol/lTris-HCL(pH8.38);50mmol/lHCL;1.5-2.5mmol/lMgCL2;200umol/ldNTP;2UDapDNA聚合酶。總反應(yīng)體系為50ul,反應(yīng)用去離子水均需用12000uw/cm2紫外燈照射。
  
  VenorGeM支原體污染檢測試劑盒(一步法)支原體PCR檢測試劑盒組成:
  
  Mix干粉(引物、dNTP、熱啟動taq酶,內(nèi)控對照),重懸緩沖液,陽性對照DNA,Tris/EDTA緩沖液。
  
  特點(diǎn):
  
  廣譜(包含常規(guī)26種支原體)
  
  靈敏度高
  
  特異性好
  
  操作簡單
  
  便捷(整個操作不到3小時)
  
  
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